Tinción de Gram
Fundamentos: Es un tipo de tinción diferencial basado en la presencia de peptidoglicano dentro de las paredes celulares de las bacterias y las define como gram positivas o gram negativas.
Características:
Usualmente es el primer paso para la identificación de una nueva bacteria y cuando resultan gram positivas terminan con un color azul/púrpura mientras que cuando resultan negativas tienen uno rojo/rosado.
Usos: Es muy utilizado en el estudio de fluidos corporales para detectar bacterias o infecciones.
Aplicaciones: Médicas, Bacteriológicas.
Material: Agua, genciana de violeta, un mechero, yodo, alcohol y safranina.
Técnica: Se aplica cristal de violeta o genciana al frotis, después se pone yodo y se espera por un minuto.
Más adelante se aplica etanol al 75% para decolorar y se aplica un contraste como lo es la safranina, dejándose reposar por 1 minuto.
Tinción de Ziehl Neelsen
Fundamentos: Ésta técnica es utilizada con bacterias ácido-alcohol resistente porque éstas no pueden ser exitosamente diferenciadas con otros métodos de tinción diferencial, como lo es la tinción de Gram ya vista. Debe de aplicarse calor y tinciones concentradas para poder diferenciarlas en un contraste de rojo y azul.
Características: La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificación de lo ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energía cinética de las moléculas del colorante lo cual también facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias que resisten la decoloración son de color rojo y la que no se ven de color azul, ya que se utiliza azul de metileno como tinción de contraste.
Usos: Éste tipo de tinción se utiliza en bacterias que tienen una alta resistencia ácido-alcohol, porque de otra manera no se podrían diferenciar mediante tinción.
Aplicaciones: Médica, bacteriológicas.
Material: Carbol fuschil, papel, etanol junto con ácido clorhídrico.
Técnica: Se cubre la muestra con papel, después se llena de carbol fuschil un lado del porta objetos por 3-5 minutos mientras se calienta con vapor o la placa misma. Se remueve el papel y se decoloriza con una mezcla de ácido hidroclórico y etanol. Después se agrega azul de metileno y listo.
Tinción de Hematoxilina Eosina
Fundamentos: Es vital en la tinción histológica de los tejidos humanos dentro del laboratorio ya que ayuda a diferenciar los tipos de células dentro de la muestra unos de otros.
Características: Se aplica un compuesto de hematoxilina y aluminio, utilizado para colorear los núcleos celulares de azul. Más adelante se hace una contratinción de una solución acuosa o alta en etanol de Eosina Y, la cual colorea otras estructuras de rosa, rojizo, púrpura y naranja.
Usos: Es muy usado en la diferenciación celular histológica de biopsias en pacientes con alta probabilidad de cáncer y otras anormalidades celulares.
Aplicaciones: Histología, Biopsias médicas.
Material: Xilol, Alcohol, Hematoxilina y Eosina.
Técnica: Se sumerge la muestra en xileno para eliminar cualquier exceso de parafina. Acto seguido pasa por una serie de alcoholes a 100, 95 y 70 grados respectivamente. Se lava en agua para eliminar el exceso de alcohol, se sumerge en hematoxilina por 10 minutos y se pasa rápidamente en alcohol ácid. Se lava y se sumerge 30 segundos en eosina, se pasa por otra serie de alcoholes en serie creciente y finalmente se deja remojar 10 minutos en xilol.